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Full Moon BioSystems社は、抗体マイクロアレイ、組織マイクロアレイを中心に、DNA、タンパク質マイクロアレイ用スライドを販売しております。今回は、りん酸化/各種生体パスウェイの網羅的解析に最適な抗体アレイを紹介します。 |
■ 特長
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- りん酸化/各種生体パスウェイの網羅的解析に最適
- 厳密に選抜した抗体を用いた抗体アレイ
- 簡便なプロトコール
- 高特異性/低バックグラウンド
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■ 製品ラインアップ
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| Phosphorylation Antibody Arrays |
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PathwayFocused Antibody Arrays |
| ● AKT Pathway(137) |
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● Angiogensis(127) |
| ● Cancer/Apoptosis(155) |
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● Apoptosis(71) |
| ● Cell Cycle(76) |
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● Cancer Maker(84) |
| ● Chromatin/Transcription(173) |
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● Cell Cycle(58) |
| ● Cytoskeletal Pathway(95) |
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● Cytokine(77) |
| ● Insulin/Glucose(85) |
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● Hematopoiesis(49) |
| ● JAK/STAT Pathway(42) |
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● Hormone(30) |
| ● MAPK Pathway(185) |
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● Signal Transduction(163) |
| ● Neuroscience(32) |
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● Stem Cell(48) |
| ● NFkB Pathway(63) |
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| ● Nuclear/Membrane Receptor(52) |
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| ● Tyrosine Kinase/Adaptors(98) |
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| ()内は、アレイに固定されている抗体の種類の数を提示しています。 |
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■ Cell Cycle Phospho Antibody Arrayの使用例と概要
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| Chk, Myc, p53, p73等のりん酸化抗体 |
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| BRCA, HDAC, p21, p27等のりん酸化抗体 |
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| Chk, Myc, p53, p73等の非りん酸化抗体 |
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| BRCA, HDAC, p21, p27等の非りん酸化抗体 |
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図左：Cell Cycle Phospho Antibody Array：細胞のライセート中のタンパク質をビオチン標識したものをスライドに
添加した後、ストレプトアビジン標識したCy-3を添加し検出
図右：Cell Cycle Phospho Antibody Array上に固定されている主な抗体の種類
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| △TOPへ |
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| Slide dimensions |
76 × 25 × 1 mm |
| Barcode label |
included |
| Label size |
23 × 9 mm |
| Spot diameter |
280-320 µm |
| Spot-to-spot distance |
600-700 µm |
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■ MAPK Pathway Phosphorylation Antibody Arrayの場合(185種類の抗体)
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Block 4 にスポットされている抗体の種類
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| 番号 |
抗体の種類 |
番号 |
抗体の種類 |
| 64 |
Pyk2(Phospho-Tyr402) |
75 |
Met(Phospho-Tyr1349) |
| 65 |
4E-BP1(Phospho-Thr36) |
76 |
c-Kit(Phospho-Tyr721) |
| 66 |
4E-BP1(Phospho-Thr45) |
77 |
p44/42 MAP Kinase(Phospho-Thr202) |
| 67 |
Stathmin 1(Phospho-Ser24) |
78 |
p44/42 MAP Kinase(Phospho-Tyr204) |
| 68 |
Stathmin 1(Phospho-Ser37) |
79 |
HSP27(Phospho-Ser78) |
| 69 |
Met(Phospho-Tyr1234) |
80 |
HSP27(Phospho-Ser82) |
| 70 |
IRS-1(Phospho-Ser636) |
81 |
SAPK/JNK(Phospho-Thr183) |
| 71 |
IRS-1(Phospho-Ser639) |
82 |
SAPK/JNK(Phospho-Tyr185) |
| 72 |
elF4E(Phospho-Ser209) |
83 |
P38 MAPK(Phospho-Thr180) |
| 73 |
Stathmin 1(Phospho-Ser15) |
84 |
P38 MAPK(Phospho-Tyr182) |
| 74 |
IRS-1(Phospho-Ser307) |
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★Block8, Block9には、Block4にスポットされている各りん酸化抗体に対応する非りん酸化抗体がスポットされて
おり、タンパク質のりん酸化と非りん酸化の双方を確認できます。
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△TOPへ |
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抗体アレイを使用する際には、細胞や組織からのタンパク質の抽出とサンプルのビオチン標識を行う必要があります。これらの操作には、Antibody
Array Assay Kit(メーカー製品番号：KAS02)を別途、必要に応じてご購入ください。★印は、Assay
Kitに含まれています。以下に
掲載のプロトコールは、簡略化しています。詳細な操作は、必ず添付文書をご確認ください。
＜培養細胞をサンプルとしCy-3を用いた検出の場合＞
1）サンプルの調製
① 細胞のペレットにExtraction Buffer(★)を添加し、氷上で10分間インキュベーションします。10,000g（4℃,
30分間）で遠心した後、
ライセートを回収します。
② 1mgのBiotin Reagent(★)を100µlのDMF(★)に添加し、Biotin/DMF溶液を調製します。このBiotin/DMF溶液10µlに40µlのLabeling
Buffer(★)を添加します。本溶液2µlを100µgのタンパク質量（もしくはそれ以下の量）を含むライセート10µl（もしくはそれ以下の容量）に
添加します。混合した後、25µlのStop Solution(★)を添加し、室温で30分間インキュベーションします。
③ 上記のビオチン化したサンプルをCoupling Buffer(★)で20倍に希釈し、Coupling溶液を調製します。
2）アレイの準備
① アレイをBlocking Buffer(★)を用いてブロッキングした後、Wash Solution(★)、超純水で洗浄します。
② アレイをLayout Slide上に配置した後、アレイ表面をLifterSｌipでカバーします。
③ 調製したCoupling溶液をLifterSlipの一方からピペッティングによりゆっくりと注入します。調製した残りの溶液を反対の方向からゆっくりと
注入し均一に拡散させます（下図参照）。
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④ Layout Slideからアレイを取り外した後、湿度室にて、室温で2時間インキュベーションします（4℃の場合はオーバーナイトインキュベーション）。
⑤ アレイをWash Solution(★)に浸漬し、LifterSlipを取り外し、Wash Solution(★)、超純水で洗浄します。
3）Cy-3を用いた検出
① 60mlのDetection Buffer(★)に60µlのCy-3-Streptavidin*1(0.5mg/ml)を添加します。調製した本溶液にアレイを浸漬し、攪拌装置上にて
（55rpm）、室温で40-60分間インキュベーションします（インキュベーション中はアルミホイルで遮光してください）。
② アレイをWash Solution(★)、超純水で洗浄してください。
③ マイクロアレイスキャナ*2を用い、測定を行います。
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| *1 |
Full Moon BioSystems社では販売しておりません。
別途ご購入をお願いします。 |
| *2 |
アフィメトリクス社のスキャナは使用できません。 |
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△TOPへ
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| ■ Antibody Array |
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■ Antibody Array Assay Kit |
| 製品内容 |
容量 |
用途 |
| Antibody Microarray |
2 slides |
Microarray |
| Layout Slide |
1 |
Array layout |
| LifterSlips |
2 |
Coupling |
| Gal File (CD) |
1 |
Data Analysis |
| User's Guide (CD) |
1 |
Instructions |
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| 製品内容 |
容量 |
用途 |
| Biotin Reagent |
1 mg |
Labeling |
| Blocking Reagent |
50 ml |
Blocking |
| Coupling Reagent |
2 ml |
Coupling |
| Detection Buffer |
60 ml |
Detection |
| DMF |
1 ml |
Labeling |
| Extraction Buffer |
1.5 ml |
Protein extraction |
| Dry Milk ("Milk Solution") |
3 g |
Coupling |
| Labeling Buffer |
2 ml |
Labeling |
| Stop Reagent |
500µl |
Stop labeling reaction |
| 10× Wash Solution |
2 × 50 ml |
Washing |
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△TOPへ
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| 製品名 |
交差性 |
抗体種 |
メーカー製品番号 |
容量 |
価格 |
| Pathway Focused Antibody Arrays |
| Angiogenesis Antibody Array |
Human |
127 |
AGE125 |
2 slides |
108,000 |
| Apoptosis Antibody Array |
Human |
71 |
APP069 |
2 slides |
67,000 |
| Cancer Marker Antibody Array |
Human |
84 |
ACM083 |
2 slides |
80,000 |
| Cell Cycle Antibody Array |
Human |
58 |
ACC058 |
2 slides |
60,000 |
| Cytokine Related Antibody Array |
Human |
77 |
ACK075 |
2 slides |
72,000 |
| Hematopoiesis Antibody Array |
Human |
49 |
AHT049 |
2 slides |
52,000 |
| Hormone Antibody Array |
Human |
30 |
AHM030 |
2 slides |
48,000 |
| Signal Transduction Antibody Array |
Human |
163 |
AST160 |
2 slides |
122,000 |
| Stem Cell Antibody Array |
Human |
48 |
ASC048 |
2 slides |
53,000 |
| Phosphorylation Antibody Arrays |
| AKT Pathway Phospho Antibody Array |
Human |
137 |
PAA137 |
2 slides |
117,000 |
| Mouse |
| Cancer/Apoptosis Phospho Antibody Array |
Human |
155 |
PAC155 |
2 slides |
119,000 |
| Mouse |
| Cell Cycle Phospho Antibody Array |
Human |
76 |
PCC076 |
2 slides |
72,000 |
| Mouse |
| Chromatin/Transcription Phospho Antibody Array |
Human |
173 |
PCT173 |
2 slides |
122,000 |
| Mouse |
| Cytoskeletal Pathway Phospho Antibody Array |
Human |
95 |
PCP095 |
2 slides |
88,000 |
| Mouse |
| Insulin/Glucose Phospho Antibody Array |
Human |
85 |
PIG085 |
2 slides |
80,000 |
| Mouse |
| Jak/Stat Pathway Phospho Antibody Array |
Human |
42 |
PJS042 |
2 slides |
52,000 |
| Mouse |
| MAPK Pathway Phospho Antibody Array |
Human |
185 |
PMK185 |
2 slides |
122,000 |
| Mouse |
| Neuroscience Phospho Antibody Array |
Human |
32 |
PNS032 |
2 slides |
49,000 |
| Mouse |
| NF-kappa B Pathway Phospho Antibody Array |
Human |
63 |
PNK063 |
2 slides |
63,000 |
| Mouse |
| Nuclear/Membrane Receptor Phospho Antibody Array |
Human |
52 |
PNR052 |
2 slides |
56,000 |
| Mouse |
| Tyrosine Kinase Adaptor Phospho Antibody Array |
Human |
98 |
PTK098 |
2 slides |
88,000 |
| Mouse |
| Antibody Array Assay Kit |
Antibody Array Assay Kit for Protein Extraction
and Labeling |
- |
- |
KAS02 |
1 kit
(2 slides) |
67,000 |
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| 保存条件：-20℃ |
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| ※掲載の内容は、'07年10月現在の情報に基づいております。 |
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| (C)2000 ナカライテスク株式会社 ■製品に関するお問合せ E-mail:info-web@nacalai.co.jp |
