HOME > 新製品情報 > 高機能型Niキレートアガロース　COSMOGEL^® His-Accept

高機能型Niキレートアガロース

COSMOGEL^® His-Accept

ヒスチジンタグ融合タンパク質の精製用として使用されるNiキレートアガロースに、画期的新製品が登場しました。独自のキレート方法により耐薬品性能を飛躍的に向上させました。

■ 特長

高濃度の還元剤やキレート剤の存在下で使用可能！
高純度のヒスチジンタグ融合タンパク質を回収可能！
キレートアガロースからのNi溶出で世界最小レベルを実現！

■ 使用例

■ 高濃度還元剤下での使用例	■ 精製タンパク質の純度比較例
		GST-Hisを発現させた大腸菌のライセートを、各社の金属キレートゲルを用い同一条件で精製後、SDS-PAGE、銀染色を行いました。他社金属キレートゲルに比べ、高純度でヒスチジンタグ融合タンパク質の精製ができています。
20mmol/lのDTTを含んだ緩衝液で同一カラムを用いてGST-Hisの精製を連続4回実施しました。 4回目の精製においてもDTT非存在下と同等の性能を示しています。

■ 薬品耐性

■ ニッケル溶出量の比較例

Binding Bufferに左記濃度の還元剤やキレート剤を加えたものおよびpH4のくえん酸緩衝液を、それぞれ500µlの担体に10ml流し、溶出した液を原子吸光分析しました。溶出したNiの量は低レベルに抑えられています。

■ 還元剤とEDTAの影響

金属キレートゲルに 5mmol/l DTT と 50mmol/l EDTA を 5ml 流しました。
A社品では 5mmol/l DTT で褐変、50mmol/l EDTA でニッケルの脱落が起こっています。
当社品ではどちらの条件でも変化は見られません。

■ 許容濃度例

還元剤	20 mmol/l DTT	20 mmol/l TCEP
還元剤	50 mmol/l 2-Mercaptoethanol	40 mmol/l Reduced Glutathione
変性剤	8 mol/l Urea	6 mol/l Guanidine Hydrochloride
界面活性剤	2% Triton X-100	2% Tween 20
	2% NP-40	2% CHAPS
	1% Cholate
添加剤	50 mmol/l EDTA	2 mol/l NaCl
	400 mmol/l L-Arginine	20% Ethanol
	Protease Inhibitor Cocktail^＊1（×5）	Phosphatase Inhibitor Cocktail^＊2（×5）

上記添加物を含む結合・洗浄・溶出緩衝液を用いたヒスチジンタグ融合タンパク質の精製が可能
^＊1　弊社Protease Inhibitor Cocktail（×100）（一般用：製品番号04080-11、EDTA free：製品番号03969-21）
^＊2　弊社Phosphatase Inhibitor Cocktail（×100）（製品番号07574-61、EDTA free：製品番号07575-51）

■ 製品仕様

粒子サイズ	50-150µm
マトリックス	6％架橋アガロース
容量^＊（回収量mg/ゲルml）	5-10 mg/ml
推奨線流速	26 cm/h
限界圧	2.6 psi (0.18 bar)
pH安定性	3-12
供給状態	20％エタノール中に50％懸濁液、Ni処理済み

^＊35.6kDaのヒスチジンタグ融合タンパク質をBradford法（γ-グロブリン：スタンダード）により算出した場合、ゲル1mlあたり約7mgの目的タンパク質が回収できます。

■ 価格表

製品名	規格	貯法	製品番号	容量	価格
COSMOGEL^® His-Accept	SP	冷蔵	08368-12	25 ml	36,000
			08368-54	100 ml	120,000
			08368-25	500 ml	ご照会

※掲載の内容は、'08年3月現在の情報に基づいております。