离子交换模式 | 阴离子交换型 | 阳离子交换型 | 两性离子交换型 | ||||||
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填料 | Q型 | Q-N型 | S型 | S-N型 | M型 | M-N型 | |||
硅胶 / 平均粒径 |
亲水性聚合物 / 5 µm | ||||||||
平均孔径 | 1000 Å | Non-porous | 1000 Å | Non-porous | 1000 Å | Non-porous | |||
功能基 | -CH3N+(CH3)3 | -(CH2)3SO3- | -CH3N+(CH3)3 + -(CH2)3SO3- |
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蛋白质承载力 | 110-150 mg | 12-20 mg | 70-100 mg | 10-18 mg | 55-75 mg(BSA)/ml 35-50 mg(IgG)/ml |
6-10 mg(BSA)/ml 5-9 mg(IgG)/ml |
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BSA/ml-resin | human IgG/ml-resin | ||||||||
目标样品 | Acidic Proteins / DNA | Basic Proteins | All Proteins | ||||||
应用领域 | 净化提纯 | 超高速分析 | 精确分析 | 净化提纯 | 超高速分析 | 精确分析 | 净化提纯 | 精确分析 | |
柱尺寸 I.D. x Length(mm) |
4.6 x 50 | 4.6 x 30 | 4.6 x 100 | 4.6 x 50 | 4.6 x 30 | 4.6 x 100 | 4.6 x 50 | 4.6 x 100 |
两性离子交换型色谱柱可以同时分离样品中的酸性蛋白质与碱性蛋白质。
Q型 | S型 | M型 |
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分析条件 | |||
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色谱柱 | COSMOGEL IEX (4.6 mm I.D. x 50 mm) | ||
流动相 | A: 20 mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) B: 20 mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) + 0.5 mol /l NaCl B: conc. 0→100% 30 min Linear Gradient |
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流速 | 0.5 ml/min | ||
温度 | 30°C | ||
检测器 | UV 220 nm | ||
样品 |
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使用了多孔性填料的Q型,S型和M型相比于非多孔性填料可以承载更多蛋白质,即使一次大量进样峰形依然尖锐。所以此类型色谱柱适用于蛋白质的净化提纯。
分析条件 | |
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色谱柱 | COSMOGEL IEX Type S (4.6 mm I.D. x 50 mm) |
流动相 | A: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) B: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) + 0.5mol/l NaCl B conc. 0→100% 30min Linear Gradient |
流速 | 0.5 ml/min |
温度 | 30°C |
检测器 | UV 280 nm |
样品 | 1. Ribonuclease A 2. Cytochrome C 3. Lysozyme |
使用了非多孔性填料的Q-N型, S-N型, M-N型可以抑制样品在填料内的扩散。另外,此类型色谱柱的柱长较长,也在另一方面保证了峰形的尖锐。此类型适用于抗体药物的质量控制等精密分析。
S型 (4.6 mm I.D. x 50 mm) | S-N型 (4.6 mm I.D. x 100 mm) |
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分析条件 | |||
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色谱柱 | COSMOGEL IEX | ||
流动相 | A: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) B: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) + 0.5 mol/l NaCl B conc. 0→100% Linear Gradient |
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流速 | 0.5ml/min | ||
温度 | 30°C | ||
检测器 | UV 220 nm | ||
样品 |
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多孔性填料即使在高流速下也不会对分离度造成很大影响。另外,此类色谱柱的柱长较短,有利于高速分析。
S型 (4.6 mm I.D. x 50 mm) | S-N型 (4.6 mm I.D. x 30 mm) |
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分析条件 | |||
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色谱柱 | COSMOGEL IEX | ||
流动相 | A: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) B: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH6.8) + 0.5 mol/l NaCl B conc. 0→100% Linear Gradient Type S: 30min Type S-N: 10 min |
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流速 | Type S: 0.5ml/min Type S-N: 1.0ml/min | ||
温度 | 30°C | ||
检测器 | UV 220 nm | ||
样品 |
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分析条件 | |
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流动相 | A: 20mmol/l Tris buffer(pH8.3) B: 20mmol/l Tris buffer(pH8.3) + 0.5mol/l NaCl B conc. 0% (0-13min) 0→100%(13-43min) 100% (43-53min) |
流速 | 0.5 ml/min |
温度 | 8 °C |
检测器 | ÅKTAexplorer 10 S |
样品 | Trypsin Inhibitor from Soybean (1mg/ml) |
进样量 | 500 µl |
Data courtesy of Kei WADA, Ph. D., Department of Biological Sciences, Graduate School of Science, Osaka University
分析条件 | |
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色谱柱 | COSMOGEL IEX Type Q 4.6mmI.D.-50mm |
流动相 | A: 20mmol/l Tris buffer(pH8.0) B: 20mmol/l Tris buffer(pH8.0) + 0.5mol/l NaCl B conc. 30% (0min) 35% (0-30min) 50% (30-50min) 100% (50-55min) 30% (55min-) |
流速 | 0.5 ml/min |
温度 | Room Temperature |
检测器 | UV280nm |
样品 | His-tag Protein in 20mmol/l Tris buffer(pH8.0) (Lane 4) |
进样量 | 5.0ml |
色谱柱材料 : PEEK 连接类型 : Waters型