如何调整流动相?
Q5. 如何调整流动相?
请参照技术信息1。
注意;
- 每次都需要精确调整流动相比例和缓冲液浓度,因为浓度和pH值可能会影响分离度。
- 溶剂混合后需要脱气。
Q6. 流动相应该使用什么等级的溶剂?
我们推荐使用色谱纯级溶剂。
注意;
分析纯试剂不能用于梯度分析和微量分析因为他们含有紫外吸收的杂质,会引起基线不稳或影响检测结果。特别在短波长 210-220nm处,此影响会更加明显。
分析纯试剂中含有抗氧化剂可能会产生鬼峰(如四氢呋喃, 氯仿)。分析纯试剂的三氟乙酸由于化学性质不稳定,不推荐用于高效液相。
Q7. 乙腈和甲醇的区别?
下表显示了乙腈与甲醇的不同。
乙腈( 高效液相用) | 甲醇( 高效液相用) | |
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压力 | ![]() 有机溶剂的种类和混合比例的不同导致压力不同。相同浓度下乙腈的压力比甲醇的大。 |
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洗脱能力 | ![]() 在同样浓度下,乙腈/水流动相的洗脱能力比甲醇/水流动相的洗脱能力大。 洗脱能力大约有10%的差距。 例如:乙腈/水 = 60/40的洗脱能力大约与甲醇/水 = 70/30的洗脱能力一致。 |
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吸光度 | 乙腈在远紫外区(波长小于250 nm)的紫外吸光度较低 | 甲醇比乙腈在远紫外区(波长小于250 nm)的紫外吸光度高 |
流动相脱气 | 当乙腈与水混合时会吸收大量热量,从而比较难于脱气。 | 当甲醇与水混合时会放出大量热量,从而比较易于脱气。 |